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ImpedanCELL
Responsable : Christophe Denoyelle / Stéphane Pronost • Responsable Tech. : - Emilie Brotin (responsable technique, site Baclesse) : 100 % (IR) - Erika Hue (responsable technique, site LABÉO) : 30% (IR) - Christophe Denoyelle (directeur ImpedanCELL et responsable scientifique du site Baclesse): 20% - Stéphane Pronost (responsable scientifique, site LABÉO) : 20%
Adresse : ImpedanCELL
Inserm U1086 ANTICIPE - BioTICLA
Bâtiment Recherche
Centre de Lutte Contre le Cancer François Baclesse
3, Avenue du Général Harris
BP 5026
14076 Caen

complements

Certifications

Pas de certification ISO

Site web

https://www.impedancell.fr

Presentation de la plate-forme

Créée en 2012, la plate-forme ImpedanCELL de mesure de l'activité cellulaire en temps réel à haut-débit a été intégrée en 2014 aux plateaux techniques de la Structure Fédérative 4206 ICORE (Interactions Cellules, ORganismes, Environnement) de l’Université de Caen Normandie. Elle est répartie sur deux sites : CLCC F. Baclesse pour toutes les applications non infectieuses et LABÉO (Normandie Equine Vallée site de Saint Contest) pour toutes les applications infectieuses (pièce de niveau de confinement L2 ; L3 en cours d’équipement).

Sur le site du Centre F. Baclesse, elle est accueillie dans une pièce dédiée du bâtiment Recherche (CLCC F. Baclesse) au sein du laboratoire BioTICLA (Biologie et Thérapies Innovantes des Cancers de l’Ovaire) qui constitue l’un des deux axes thématiques de l’UMR Inserm 1086 ANTICIPE (Unité de Recherche Interdisciplinaire pour la Prévention et le Traitement des Cancers).
Sur le site LABÉO, elle est accueillie sur la plate-forme de Normandie Equine Vallée (site de Saint Contest) qui héberge les chercheurs de LABÉO, l’équipe BIOTARGEN (Biologie, Génétique et Thérapies OstéoArticulaire et Respiratoires - EA7450) de l’Université de Caen Normandie, le RESPE (Réseau d’Epidémio-Surveillance des Pathologies Equines) et une start-up (EquiWays ; conseil en prévention sanitaire pour les haras). La plate-forme dotée de laboratoires de confinement type L2 (L3 en cours d’équipement) permet de travailler sur de nombreux pathogènes.

ImpedanCELL constitue une plate-forme innovante et originale permettant d’appréhender l’activité cellulaire en temps réel et à haut-débit par deux types de technologies, d’une part la mesure d’impédance (xCELLigence) et d’autre part l’imagerie cellulaire (IncuCyte S3). Grâce au soutien du Centre François Baclesse, de LABÉO, de la SF ICORE, de l'Université de Caen Normandie, de la région Normandie, de l’Etat et de l’Europe (FEDER), la plate forme ImpedanCELL est dotée de plusieurs équipements à haut-débit basés sur la technologie xCELLigence (ACEA Biosciences Inc.) permettant d’appréhender l’activité cellulaire en temps réel sans aucun marquage. Alliance de la microélectronique et de la biologie cellulaire, cette technologie est basée sur une mesure d'impédance, les cellules poussant sur un support de microélectrodes d’or en modifiant le flux électronique. Une mesure d’impédance peut être réalisée fréquemment (30 secondes étant l’intervalle minimal entre deux mesures) permettant ainsi de caractériser avec une grande précision aussi bien les événements précoces que tardifs de la réponse cellulaire. Sur le site du Centre F. Baclesse, la plate-forme propose l’accès à deux systèmes xCELLigence MP de 6 plaques 96 puits chacun et d’un système xCELLigence DP de 3 plaques 16 puits permettant l’étude de la prolifération, de la mort cellulaire, de l’adhésion, de la migration et de l’invasion, en passant par l’étude des changements de morphologie cellulaire ou par l’analyse fonctionnelle de récepteurs (GPCR, RTK). Des applications directes dans des domaines aussi variés que l’oncologie, les neurosciences, la toxicologie, l’immunologie ou la biologie marine sont envisageables. Un suivi quotidien de la morphologie cellulaire, notamment indicatrice de la nature du phénomène observé (adhésion, détachement cellulaire, prolifération, mort cellulaire, transition épithélio-mésenchymateuse, différenciation…) est également possible grâce à l’utilisation d’un microscope haut débit Cellavista dédié à l’utilisation de microplaques (SynenTec GmbH). Un autre système xCELLigence MP de 6 plaques 96 puits est également disponible sur le site de LABÉO dans un laboratoire confiné de type L2 permettant les expérimentations dans le domaine de la virologie et de la microbiologie. Par ailleurs, un système mobile appelé iCELLigence (2 x 8 puits) dédié prioritairement à la formation, peut également être utilisé de façon ponctuelle pour répondre à des besoins spécifiques sur des sites extérieurs.
Enfin, dans le cadre d’une réflexion scientifique engagée de façon commune, la plate forme ImpedanCELL s’est dotée en 2017 de deux systèmes d’imagerie cellulaire en temps réel (IncuCyte S3, Sartorius) répartis sur chacun des deux sites. Cet équipement automatise l’acquisition et l’analyse d’image en cinétique à long terme, directement dans un incubateur, et permet l’étude de 6 plaques 96 puits (ou d’autres formats tels que les flacons de culture de 25 ou 75 cm2) de façon simultanée. Il est muni d’une tourelle optique automatisée avec 3 objectifs (x4, x10, x20) et autorise une visualisation en contraste de phase comme en fluorescence permettant ainsi de suivre plusieurs types d’expériences en parallèle. Ces deux systèmes ont été acquis afin d’augmenter pour chacun des deux sites la polyvalence et la capacité de réponse aux demandes d’investigations de l’activité cellulaire en temps réel à haut-débit (action de molécules sur des sphéroïdes, capacité des cellules à réinvestir un espace blessé, caractérisation de la mort cellulaire, etc.).

La plate-forme ImpedanCELL est ouverte à tout utilisateur ayant des besoins d’étude du suivi dynamique du comportement cellulaire en temps réel, y compris à haut-débit. Elle est ouverte à des collaborations et des prestations tant locales que nationales, aussi bien académiques qu’industrielles. Elle est impliquée dans des actions de formation au sein des UFR Santé et Sciences de l’Université de Caen Normandie grâce au système iCELLigence mobile. Elle propose également une formation pratique aux utilisateurs des systèmes d’impédancemétrie, et réalise tout ou partie des analyses en prestation, en fonction des demandes des utilisateurs.

Moyens et equipements

- Sur le site du Centre F. Baclesse, la plate-forme ImpedanCELL est dotée d’équipements très performants acquis grâce au soutien du Centre de Lutte contre le Cancer François Baclesse, des fonds européens (FEDER) et de l'Université de Caen Normandie (363 839,28 €) :
- deux systèmes xCELLigence MP de 6 plaques 96 puits (ACEA Biosciences) (2012);
- un système xCELLigence DP de 3 plaques 16 puits (ACEA Biosciences) (2013);
- un microscope haut-débit Cellavista (SYNENTEC GmbH) (2012).
L’université est intervenue pour compléter cet équipement dans le cadre de l’Appel à Projet Relatif au Financement d’Equipements Scientifiques :
- acquisition d’un incubateur à CO2 (MCO-5AC, capacité 49 L, Panasonic) pour l’accueil de la station xCELLigence DP (2014) et d’un incubateur à CO2 équipé d’un système intégré de décontamination (MCO-230AIC, capacité 230 L, Panasonic) et d’une étagère renforcée pour accueillir l’IncuCyte S3 (2017).

L’université et la région Normandie sont intervenues dans le cadre de ses crédits d’innovation pédagogiques pour acquérir :
- un système iCELLigence portable couplé à une tablette tactile (2015).

Le laboratoire BioTICLA a équipé la pièce d’accueil de deux postes de sécurité microbiologique (Safemate 0.9 Vision, BioAIR), deux incubateurs à CO2 (MCO-19AIC, capacité 170 L, Panasonic) pour l’accueil des deux stations xCELLigence MP et tout le petit matériel nécessaire (pipettes multicanaux, centrifugeuse…) sur fonds propres.


- Sur le site de LABÉO (locaux de niveau de confinement L2), la plate forme ImpedanCELL est dotée d’équipements très performants acquis grâce au soutien de la Région Basse-Normandie et de l’Etat avec les Contrat Plan Etat Région Filière équine (Centaure) 2014 (soutien à hauteur de 129 000 €) :
- un système xCELLigence MP de 6 plaques 96 puits (ACEA Biosciences) (2014);
- Microscope Eclipse Ti E de Nikon.
Les fonds européens (FEDER) et les fonds EPERON ont permis l’acquisition d’une partie importante des équipements de la plate-forme Hippolia dont certains matériels seront dédiés à l’utilisation du système xCELLigence:
- deux incubateurs à CO2 (STERICULT 232 L IR, ThermoScientific Forma) pour l’accueil de la station xCELLigence MP (2016);
- un poste de sécurité microbiologique (SCS 2-4, TECHGEN);
- une centrifugeuse (UniCFUGE3, LLG Labware)
Le laboratoire LABÉO a équipé les différentes pièces du petit matériel (pipettes multicanaux, pipette distributrice…) sur fonds propres.

Enfin, en 2017, une démarche (scientifique et financière) engagée de façon conjointe a permis d’acquérir deux systèmes d’imagerie cellulaire en temps réel (IncuCyte S3, Sartorius) pour chacun des sites (CPER Innovons pour le site Baclesse et CPER Centaure pour le site LABÉO, 291 200 €). Dans le cadre de l’Appel à Projet 2017 relatif au financement d’équipements scientifiques, un co-financement impliquant l’Université de Caen Normandie, la SF ICORE et la plate-forme ImpedanCELL (sur fonds propre) a permis d’acquérir un incubateur de 230 litres avec système de décontamination intégré pour accueillir le système IncuCyte S3 sur le site Baclesse.


- Liste des équipements disponibles sur la plate-forme

Site CLCC François Baclesse :

Equipements d’analyse cellulaire en temps réel :
• 2 systèmes xCELLigence RTCA MP (ACEA Biosciences)
• 1 système xCELLigence RTCA DP (ACEA Biosciences)
• 1 système RTCA iCELLigence mobile (ACEA Biosciences)
• 1 système d’imagerie cellulaire automatisé IncuCyte S3 (Sartorius)

Autres équipements :
• 1 microscope automatique haut-débit Cellavista® High End (SYNENTEC GmbH) (visible et fluorescence)
• 1 spectro/fluorimètre Fluo Star Optima (BMG LABTECH) mutualisé avec le laboratoire BioTICLA (Inserm U1086 ANTICIPE)
• 2 hottes à flux laminaire, postes de sécurité microbiologique de classe II
• 4 incubateurs à CO2 à atmosphère contrôlée dédiés aux 4 appareils d’équipements d’analyse cellulaire en temps réel
• 1 microscope à platine inversée
• 1 plaque chauffante
• 1 bain-marie
• 1 centrifugeuse
• 1 agitateur de microplaques
• Divers petits matériels


Site LABÉO (pièce de niveau de confinement P2) :

Analyses cellulaires en temps réel :
• 1 système xCELLigence RTCA MP (ACEA Biosciences)
• 1 système d’imagerie cellulaire automatisé IncuCyte S3 (Sartorius)


Autres équipements :
• 1 hotte à flux laminaire, poste de sécurité microbiologique de classe II
• 2 incubateurs à CO2 à atmosphère contrôlée dédiés aux 2 appareils d’équipements d’analyse cellulaire en temps réel
• 1 microscope à platine inversée l’Eclipse Ti E de Nikon
• 1 plaque chauffante
• 1 bain-marie
• 1 centrifugeuse
• Divers petits matériels

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