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Centre d'Immunophenomique - CIPHE
Responsable : Bernard Malissen • Responsable Tech. : Ana Zarubica (100%), Frederic Fiore (100%), Fabien Danjan (100%), Marie Malissen (20%), Hervé Luche (100%), Jean Pierre Gorvel (20%), Philippe Hoest (100%), Amandine Sansoni (80 %), Gilles Warcollier (100%)
Adresse : Centre d'Immunophenomique - CIPHE,
163 avenue de Luminy, Case 936
13288 Marseille

complements

Certifications


Plate-forme certifiée ISO 9001

Site web

http://ciphe.marseille.inserm.fr/

Presentation de la plate-forme

Le Centre d’ImmunoPHEnomique (CIPHE) est une unité mixte de service (Inserm US12; CNRS UMS 3367; Aix-Marseille Université) dédiée au développement et à l’analyse extensive et standardisée de souris KO/KI permettant de comprendre la fonction des gènes impliqués dans la réponse immunitaire en situation normale ou pathologique (inflammation, infection, cancer). Le CIPHE est officiellement crée depuis août 2011 en tant qu'unité de service de l’INSERM et d'Aix-Marseille Université et a été créé par le CNRS en janvier 2012 en tant qu'unité mixte de service. Le CIPHE est installé dans un bâtiment de 3500 m2 situé au sein du Parc Scientifique et Technologique de Marseille-Luminy. Les prestations offertes par cette US/UMS sont: la création de modèles innovants de souris KI/KO, l’analyse multiparamétrique de l'ensemble des populations cellulaires du système immunitaire et la possibilité de tester les réponses du système immunitaire en situation normal et pathologique (inflammation, infection, cancer).
L'ensemble de ces activités technologiques sont assurées par:
- Un service d’ingénierie génétique et transgénèse murine
Ce module est en charge du développement de lignées innovantes de souris par modification intentionnelle du génome (approches dites de knockin-knockout) en répondant au plus près aux attentes du client. Certains modèles permettront ainsi le développement de lignées reportrices murines qui permettent de suivre ou de déléter des populations spécifiques de cellules appartenant au système immunitaire inné et adaptatif.
- Un service de cryopréservation et decontamination des lignées murines
- Un service d’Immunophénotypage.
Ce service a la charge du phénotypage complet du système immunitaire de la souris par cytométrie polychromatique et par cytométrie de masse mesurant plus de 200 paramètres quantitatifs de façon normalisée et standardisée.
- Un service d'exploration fonctionnelle en condition BSL3.
Ce service aura en charge le l'analyse du système immunitaire de souris mutantes confrontées à des agents pathogènes bactériens et viraux dans un environnement confiné de type L3. L'ensemble de cette analyse sera faite via un suivi in vivo de la réponse immunitaire.
- Une animalerie de type EOPS/SOPF.
Le CIPHE est majoritairement utilisé pour le développement et l'étude de modèles murins ciblant des gènes impliqués dans la réponse immunitaire. La structure de l’animalerie et son mode de fonctionnement vise à garantir des conditions de statut sanitaires EOPS/SOPF.

Moyens et equipements

- Le service d’ingénierie génétique et transgénèse murine dispose de :
1. Laboratoire de biologie moléculaire équipé de QIAexcel, SPECTROStar nano, centrifugeuses, générateur et cuves d’électrophorèse, master cycle PCR.
2. Laboratoire de biologie cellulaire équipé des hottes, incubateurs à CO2, microscopes, centrifugeuses, Gene Pulser XCell.
3. Laboratoire de microinjection équipé des incubateurs, stereomicroscopes, manipulateurs, microscope de microinjection, hottes.
- Le service de cryopréservation et décontamination des lignées murines est équipé d’isolateur 3 et 4 gants, containeurs d’azote, hottes, centrifugeuses, microscope.
- Pour effectuer ces missions la plate-forme d’Immunophenotypage est équipée de la manière suivante:
1. Une pièce de culture contenant une hotte à flux laminaire, un incubateur CO2, une centrifugeuse, et un microscope.
2. Un laboratoire permettant la préparation des échantillons. Ce laboratoire est équipé de microfuges, d’un bain-marie, d’une hotte à flux laminaire pour les prélèvements sous conditions stérile, de deux centrifugeuses.
3. Une salle d’analyse contenant 3 postes informatiques chacun équipé de deux écrans avec à disposition les logiciels d’analyse : Diva, FlowJo, Infinicyt, FacsSuite, Kalusa, Batlab et Cytobank.
La plateforme d’Immunophenotypage contient les équipements suivants :
• Hématocytomètre, Procyte
• AutomacsProTM Miltenyi
• GentleMACSTM Octo dissociateur
• Luminex MAGPIX, Millipore
• Analyseur cytomètre 8 couleurs, 3 lasers BD FACSVerseTM
• Analyseur cytomètre18 couleurs, 5 lasers BD FACSFortessaTM
• Trieur de cellules 18 couleurs, 5 lasers, BD FACSAriaIIITM
• Cytomètre de masse Helios, Fluidigm

- Le service d'exploration fonctionnelle en condition BSL3 dispose de trois zones : animalerie expérimentale, laboratoire d’expérimentation et le module d’imagerie. Il est équipé des isolateurs, portoirs ventilés, incubateurs CO2, étuves, microscope confocal et biphoton, IVIS Lumina III, cryostat.
- L’animalerie de type EOPS/SOPF est équipée de portoirs cages ventilées (portoirs IVS Tecniplast) et ces portoirs sont alimentés par un système automatisé de distribution d’eau (Edstrom). Les locaux de l’animalerie CIPHE sont conçus et équipés pour permettre l’hébergement et la conservation de lignées et pour réaliser des travaux de recherche. Tout en répondant aux impératifs de la recherche, le personnel de l’animalerie CIPHE veille au bon soin des animaux et à leur bien-être en se conformant aux lignes directrices et politiques du Bureau d’Expérimentation Animale de l’INSERM, du Ministère de la Recherche, et de la Direction Départementale de Protection des Populations (DDPP) et aux règlements institutionnels. L’animalerie du CIPHE est divisée en plusieurs zones : laverie, secteur d’hébergement (status EOPS), zone de transgénèse, zone expérimentale, zone transfert d’embryon, zone de quarantaine et son labo de prélèvement.

Galerie

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