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ARPEGE Pharmacol. Criblage Interactome
Responsable : PREZEAU Laurent • Responsable Tech. : MAUREL Damien
Adresse : Plateforme Pharmacologie Criblage Interactome, IGF, 141 rue de la Cardonille
34094 Montpellier

complements

Certifications


Plate-forme certifiée ISO 9001

Site web

http://www.arpege.cnrs.fr/

Presentation de la plate-forme

La plateforme ARPEGE - Pharmacologie Criblage interactome met à disposition des utilisateurs ses compétences et ses équipements dédiés : 1- aux techniques de criblage à moyen débit de petites chimiothèques (ciblées notamment sur les récepteurs membranaires, les canaux ioniques, etc.) et analyse du mode d'action des composés ; 2- à la caractérisation fonctionnelle à moyen débit de protéines cibles (récepteurs et autres) et collections de leurs variants (isoformes, mutants naturels et artificiels, etc.) ; 3- à l’analyse des voies de transduction du signal ; et 4- à l’analyse d’interaction entre protéines. Ces techniques sont basées : 1- sur l'utilisation de sondes fluorescentes (telles que le Fluo4 pour le calcium) ; 2- sur des technologies de transfert d’énergie entre fluorophores (FRET, BRET et TR-FRET). ; sur des techniques label-free (xCELLigence, BT CORNING).

Moyens et equipements

Neuf appareils sont actuellement en service ou en phase d'optimisation sur la plate-forme. La liste des techniques en place sur la plate-forme est en constante évolution grâce à la mise au point permanente de nouvelles techniques et tests.
1&2 - FLEXSTATION™Version 3 (MOLECULAR DEVICES) - Spectrofluorimètre, luminomètre, avec transfert automatisé de plaque à plaque, - Equipé d’un monochromateur qui permet: - pour la fluorescence : une gamme d’excitation de 250 à 850 nm, et une gamme d’émission de 360 à 850 nm ; - pour la luminescence : une gamme d’émission de 360 à 850 nm - Exemples de Tests : - Mesure de signaux calciques intracellulaires à l’aide de la sonde fluorescente Fluo4, sur cellules entière. Fluorescence, ELISA - Format : - Plaque 96 puits. Acquisition 2008.
3- RUBYstar® (BMG) - Fluorimètre pour fluorescence en temps résolu TR-FRET (excitation LASER 337 nm; détection 620 et 665 nm) - Exemples de Tests : - Mesure de la formation de seconds messagers intracellulaires AMPc et IP123 (Kit AMPc-HTRF et IP One-HTRF de Cisbio Bioassay) - Mesure d’interaction entre protéines par la technologie HTRF de CisBio - Format : - Plaques 96 puits. Acquisition 2004.
4- PHERAstar® (BMG) - Fluorimètre pour fluorescence en temps résolu TR-FRET (excitation LASER 337 nm; détection 620 et 665 nm et autres) - Exemples de Tests : - Mesure de la formation de seconds messagers intracellulaires AMPc et IP123 (Kit AMPc-HTRF et IP One-HTRF de Cisbio Bioassay) - Mesure d’interaction entre protéines par la technologie HTRF de CisBio - Mesure de demi-vie de fluorescence - Format : - Plaques 96-384 puits. Acquisition 2010.
5&6- MITHRAS TM LB89 (BERTHOLD) - Deux appareils - Luminomètre équipé d’un injecteur : Fluorescence, luminescence, transfert d’énergie (BRET/FRET) (excitation : 535nm et 485nm ; émission : 460, 535, 485, F530eYFP, F400Deep, F515) - 4 injecteurs - Exemples de Tests : - Mesure d’interaction entre protéines par la technologie de transfert d’énergie (BRET, bioluminescence) - Format : - Plaques 24 et 96 puits. Acquisition 2005.
7- INFINITE F500 (TECAN) :
Fluorimètre-luminomètre pour technologies HTRF et BRET
Tests de routine en format Plaques 96 puits, avec injecteurs - Exemples de Tests : - Mesure d’interaction entre protéines par la technologie de transfert d’énergie (BRET et TR-FRET (HTRF)), Mesure de la formation de seconds messagers intracellulaires AMPc et IP123 (Kit AMPc-HTRF et IP One-HTRF de Cisbio Bioassay) - Format : - Plaques 96 puits. Acquisition 2008.
8 - xCELLigence (ACEA) :
Système d'analyse cellulaire basé sur une mesure d'impédance en temps réel. Exemples d'applications : adhésion, prolifération, migration, viabilité cellulaire, etc. Aucun marquage des cellules n'est requis d'ou la possibilité de travailler en système natif.
9 - Epic BT (CORNING) :
Système d'analyse basé sur une mesure dynamique de la redistribution de masse induite par un évènement biologique. Exemples d'applications : essais biochimiques pour l'analyse d'interactions protéine-protéine (antigène-anticorps, ligand-récepteur, etc.), essais cellulaires pour l'analyse de la signalisation cellulaire.

Galerie

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