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ARPEGE Pharmacologie Criblage Interactome
Responsable : PREZEAU Laurent • Responsable Tech. : MAUREL Damien Pourcentage de temps consacré à la plateforme : 100%
Adresse : Plateforme Pharmacologie Criblage Interactome, IGF, 141 rue de la Cardonille
34094 Montpellier

complements

Certifications


Plate-forme certifiée ISO 9001

Site web

http://www.arpege.cnrs.fr/

Presentation de la plate-forme

La plateforme ARPEGE - Pharmacologie Criblage Interactome - met à disposition des utilisateurs ses compétences et ses équipements dédiés : 1- aux techniques de criblage à moyen débit de petites chimiothèques (ciblées notamment sur les récepteurs membranaires et les canaux ioniques) et analyse du mode d'action des composés ; 2- à la caractérisation fonctionnelle à moyen débit de protéines cibles (récepteurs et autres) et collections de leurs variants (isoformes, mutants naturels et artificiels) ; 3- à l’analyse des voies de transduction du signal ; et 4- à l’analyse d’interaction entre protéines. Ces techniques sont basées : 1- sur l'utilisation de sondes fluorescentes (telles que le Fluo4 pour le calcium) ; 2- sur des technologies de transfert d’énergie entre fluorophores (FRET, BRET et TR-FRET) ; 3- sur des techniques label-free (xCELLigence, BT CORNING); 4- sur l'utilisation d'un robot pipeteur/diluteur.

Moyens et equipements

Dix appareils sont actuellement en service ou en phase d'optimisation sur la plate-forme. La liste des techniques en place sur la plate-forme est en constante évolution grâce à la mise au point permanente de nouvelles techniques et tests.

1&2 - FLEXSTATION 3 (MOLECULAR DEVICES). Spectrofluorimètre, luminomètre équipé d'un module de pipetage (8 canaux) programmable permettant un transfert simultané de réactifs d'une plaque source (96 puits) vers la plaque de lecture. Equipé d’un monochromateur ce lecteur permet de réaliser des mesures de fluorescence/luminescence entre 250 et 850 nm.

Exemple d'application : mesure de signaux calciques intracellulaires à l’aide de la sonde fluorescente Fluo4. Format : plaque 96 puits. Acquisition en 2008.

3- SPARK20M (TECAN). Spectrofluorimètre permettant des mesures de fluorescence et de FRET en temps résolu (TR-FRET, HTRF). Equipé d’un monochromateur et de filtres ce lecteur permet de mesurer la fluorescence entre 230 et 900 nm.

Exemples d'applications : mesure de la production de seconds messagers intracellulaires AMPc et IP1, mesure d’interaction entre protéines (FRET, TR-FRET, HTRF). Format : plaques 96-384 puits. Acquisition en 2017.

4- PHERAstar (BMG). Fluorimètre pour des mesures de fluorescence et de FRET en temps résolu (TR-FRET, HTRF).

Exemples d'applications : mesure de la production de seconds messagers intracellulaires AMPc et IP1, mesure d’interaction entre protéines (HTRF, TR-FRET), mesure de la demi-vie de fluorescence. Format : plaques 96-384 puits. Acquisition en 2010.

5&6- MITHRAS LB940 (BERTHOLD). Luminomètre équipé de 4 injecteurs pour des mesures de fluorescence, luminescence et transfert d’énergie (BRET).

Exemples d'applications : mesure d’interaction entre protéines par la technologie de transfert d’énergie (BRET, bioluminescence). Format : plaques 96-384 puits. Acquisition en 2005.

7- INFINITE F500 (TECAN). Fluorimètre, luminomètre équipé de filtres permettant des mesures de fluorescence, de FRET en temps résolu (TR-FRET, HTRF) et de BRET.

Exemples d'applications : mesure de la production de seconds messagers intracellulaires AMPc et IP1, mesure d’interaction entre protéines (TR-FRET, HTRF, BRET). Format : plaques 96-384 puits. Acquisition en 2008.

8 - xCELLigence (ACEA). Système d'analyse cellulaire basé sur une mesure d'impédance en temps réel.

Exemples d'applications : adhésion, prolifération, migration, viabilité cellulaire. Aucun marquage des cellules n'est requis d'ou la possibilité de travailler en système natif.

9 - Epic BT (CORNING). Système d'analyse basé sur une mesure dynamique de la redistribution de masse induite par un évènement biologique.

Exemples d'applications : essais biochimiques pour l'analyse d'interactions protéine-protéine (antigène-anticorps, ligand-récepteur, etc.), essais cellulaires pour l'analyse de la signalisation cellulaire.

10 - Robot pipeteur/diluteur Evo150 (TECAN). Système robotique équipé d'une tête LiHA 8 canaux et MCA 96 canaux.

Exemples d'applications : distribution de solutions, transfert de solutions de tubes/réservoirs vers plaques 96/384 puits, réplication de plaques 96/384 puits, dilution en série de solutions, possibilité de dilutions différentielles simultanées.

Galerie

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